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熙寧小課-第160期 | 帶狀皰疹疫苗臨床研究(二):體液和細(xì)胞免疫原性評(píng)價(jià)
發(fā)布作者:熙寧生物發(fā)布時(shí)間:2024-11-22

水痘?帶狀皰疹病毒(Varicella?zoster Virus,VZV)初次感染后數(shù)天或數(shù)周內(nèi)可在血清中檢測(cè)到VZV特異性的抗體以及VZV特異性T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答(VZV-Specific Cell?Mediated Immunity,VZV?CMI)[2]。其中VZV特異性抗體水平不會(huì)隨著年齡的增長(zhǎng)而下降,能有效預(yù)防水痘再次發(fā)生;而VZV-CMI對(duì)控制水痘-帶狀皰疹病毒至關(guān)重要,帶狀皰疹發(fā)病率與年齡相關(guān)性的VZV特異性CMI降低密切相關(guān)。老齡化、疾病或使用免疫抑制劑等因素,可導(dǎo)致VZV?CMI水平下降,并成為帶狀皰疹發(fā)生的重要條件。研究證實(shí)[3],VZV-CMI隨著年齡的增長(zhǎng)而降低,接種帶狀皰疹疫苗/主動(dòng)免疫可提高VZV-CMI,從而降低疫苗接種者感染帶狀皰疹的頻率或嚴(yán)重程度。

在帶狀皰疹疫苗臨床研究中,除了預(yù)防帶狀皰疹(Herpes Zoster, HZ)及其并發(fā)癥帶狀皰疹后神經(jīng)痛(Post-herpetic Neuralgia, PHN)的保護(hù)效力是疫苗的主要有效性指標(biāo),免疫原性指標(biāo)也是疫苗研究中的重要有效性指標(biāo)。其中,VZV特異性抗體及VZV-CMI是評(píng)價(jià)帶狀皰疹疫苗免疫原性的兩個(gè)重要指標(biāo)。CDE發(fā)表在中國(guó)新藥雜志上的文章《帶狀皰疹預(yù)防用疫苗臨床評(píng)價(jià)的考慮》[4]提到,早期臨床試驗(yàn)(I-II期)除了初步評(píng)價(jià)疫苗的安全性和耐受性以外,同時(shí)盡可能獲得免疫原性數(shù)據(jù),為選擇免疫程序和劑量提供依據(jù)。文中建議進(jìn)行免前抗體水平檢測(cè),以充分評(píng)估基線感染狀態(tài),必要時(shí)根據(jù)免前抗體水平對(duì)免后免疫原性進(jìn)行分層分析。對(duì)于創(chuàng)新型疫苗必要時(shí)應(yīng)考慮檢測(cè)抗原特異性T 細(xì)胞反應(yīng)(VZV-CMI)及相關(guān)的細(xì)胞因子指標(biāo)等。在III期確證性臨床試驗(yàn)也應(yīng)該包括免疫原性指標(biāo)與保護(hù)的相關(guān)性研究、與已上市同類疫苗的免疫原性比較研究等。此外,文中還建議在整體臨床研發(fā)計(jì)劃時(shí)一并考慮對(duì)免疫原性持久性進(jìn)行評(píng)價(jià)。


PART 01

VZV疫苗體液免疫評(píng)價(jià)


GSK公司的Shingrix/欣安立適(HZ/su)是一種含佐劑的重組帶狀皰疹疫苗,在 50歲及以上成年人中有≥90%的HZ保護(hù)率[5],由VZV糖蛋白E(gE)抗原和AS01B佐劑系統(tǒng)組成,其中g(shù)E蛋白能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體和CD4 T細(xì)胞反應(yīng),AS01B佐劑系統(tǒng)包括 QS-21和 MPL,能夠刺激局部短暫的先天免疫反應(yīng),導(dǎo)致抗原呈遞的樹突狀細(xì)胞的募集和激活。作為TLR4的激動(dòng)劑,MPL與QS-21協(xié)同作用,通過IFN-γ的產(chǎn)生增強(qiáng)對(duì)共同接種抗原的免疫反應(yīng)[6]

在Shingrix的臨床研究中,免疫原性的評(píng)價(jià)指標(biāo)包括體液免疫和細(xì)胞免疫。其中,體液免疫檢測(cè)的是血清anti-VZV antibody和anti-gE antibody水平,體液免疫的響應(yīng)被定義為在接種第一劑疫苗前具有可檢測(cè)滴度的受試者中,幾何平均濃度(Geometric Mean Concentration,GMC)增加至少4倍。

ZOE-50和ZOE-70是HZ/su的兩項(xiàng)關(guān)鍵性III期臨床試驗(yàn)[7],受試者(ZOE-50:50歲及以上;ZOE-70:70歲及以上)接種兩劑HZ/su疫苗或安慰劑,兩劑間隔2個(gè)月。在免疫原性子集中,檢測(cè)血清中anti-gE抗體和CD4+ T細(xì)胞在gE肽段刺激后的免疫反應(yīng),以評(píng)估體液(n = 3293)和細(xì)胞介導(dǎo)(n = 466)的免疫原性(圖1)。值得注意的是,在接種前,超過99%的受試者血清中檢測(cè)到anti-gE抗體陽性,疫苗組和安慰劑組的anti-gE GMCs相當(dāng)。安慰劑組受試者在接種后的任何時(shí)間點(diǎn),anti-gE GMCs均無顯著變化。疫苗組受試者接種第2劑HZ/su 1個(gè)月后,97.8%接受者達(dá)到了體液響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)(≥4倍增加),而安慰劑組只有2.0%。在第2劑接種后1個(gè)月觀察到平均峰值反應(yīng)。疫苗組的體液反應(yīng)率隨時(shí)間增加而下降,在接種后36個(gè)月為77.1%。在所有年齡組中,接種第2劑HZ/su后1個(gè)月的體液反應(yīng)率相當(dāng),但是在接種后的12、24和36個(gè)月,老年組(≥70歲)的反應(yīng)率略低??偟膩碚f,在50歲及以上的HZ/su接受者中,anti-gE抗體的GMCs分別在接種第2針后1個(gè)月和36個(gè)月時(shí),比基線水平增加了39.1倍和8.3倍。在接種后任何時(shí)間點(diǎn),不同年齡組之間的anti-gE抗體GMCs差異極小。

圖1  Shingrix誘導(dǎo)的anti-gE抗體反應(yīng)(符合協(xié)議的體液免疫原性隊(duì)列):總體響應(yīng)者百分比(A)、按年齡分組的響應(yīng)者百分比(B)、總體幾何平均濃度(GMCs)(C)、按年齡分組的GMCs(D)[7]


在一項(xiàng)II期研究(NCT00434577)[8]中,研究者評(píng)估了60歲及以上成年人接種不同配方的gE疫苗后的安全性和免疫原性,其中包括已獲批上市的RZV配方(即Shingrix)。隨后,也對(duì)接受2劑已獲批的RZV配方(即Shingrix)的參與者在接種后4年、5年和6年(NCT01295320)[9]以及9年[10]和10年(NCT02735915)[11]進(jìn)行免疫原性持久性的隨訪。

如圖2所示,所有接受2劑次gE/AS01B配方的受試者,其anti-gE抗體的GMCs顯著高于僅接種1劑次100μg gE/AS01B或接種2劑gE/生理鹽水的受試者。在整體人群和≥70歲年齡層中,接受2劑次25μg gE/AS01B受試者的GMCs低于接受2劑次50 μg或100 μg gE/AS01B的GMCs。相比之下,50 μg和100 μg gE/AS01B組之間GMCs水平相當(dāng)。在60至69歲的受試者中,接受2劑100 μg gE/AS01B受試者的GMCs高于25μg和50μg gE/AS01B的受試者。所有人群從接種后的第3個(gè)月到第36個(gè)月,GMCs有所下降,但仍然高于接種前的水平。所有接受2劑含佐劑疫苗的受試者在第36個(gè)月的anti-gE GMCs相比基線水平,有超過5.4倍的增加。對(duì)于anti-VZV的體液反應(yīng),觀察到的結(jié)果與anti-gE相似。

圖2  不同配方的gE/AS01B誘導(dǎo)的anti-gE抗體(A)和anti-VZV抗體濃度(B)[8]


對(duì)于接種已獲批RZV配方(50 μg gE/AS01B)疫苗的人群[11],在接種前anti-gE抗體的幾何平均濃度(GMC)為1240 mIU/mL(95%置信區(qū)間,1003–1535),在接種第2劑后的1個(gè)月達(dá)到峰值,為43100 mIU/mL(95%置信區(qū)間,38252–48564 mIU/mL),從第4個(gè)月開始趨于穩(wěn)定。隨訪至第108個(gè)月和第120個(gè)月時(shí),anti-gE GMC仍有9123 mIU/mL(95%置信區(qū)間,7775–10704 mIU/mL)和7384 mIU/mL(95%置信區(qū)間,6203–8790 mIU/mL),表明Shingrix可誘導(dǎo)持續(xù)的體液免疫反應(yīng)(圖3)。

圖3  接種2劑Shingrix后的10年內(nèi)anti-gE抗體的幾何平均濃度(GMCs)[11]


PART 02

VZV疫苗細(xì)胞免疫評(píng)價(jià)


Shingrix的臨床試驗(yàn)中,gE特異性的細(xì)胞介導(dǎo)免疫(CMI)反應(yīng)通過細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)方法測(cè)量,評(píng)估表達(dá)以下兩種以上激活marker的CD4 T細(xì)胞的頻率(簡(jiǎn)稱CD42+): IFN-γ、IL-2、TNF-α和CD40L。CMI反應(yīng)的cut-off值被定義為與免前相比,CD42+ T細(xì)胞的頻率增加了至少2倍(對(duì)于接種前CD42+ T細(xì)胞頻率高于每106個(gè)計(jì)數(shù)的CD4 T細(xì)胞中有320個(gè)陽性細(xì)胞閾值的參與者),或者比閾值增加了至少2倍(對(duì)于接種前頻率低于閾值的參與者)[7]。I期和II期臨床試驗(yàn)[12]表明,單劑量的HZ/su疫苗能夠引發(fā)顯著的CMI反應(yīng),在接種第二劑后進(jìn)一步增強(qiáng)。兩個(gè)關(guān)鍵的III期臨床試驗(yàn)(ZOE-50和ZOE-70)[7]的免疫原性分析結(jié)果顯示(圖4、圖5),疫苗組和安慰劑組在免前的gE特異性CD42+ T細(xì)胞頻率中位數(shù)是相似的。在安慰劑接受者中,接種后gE特異性CD42+ T細(xì)胞頻率沒有顯著變化,而HZ/su接受者的CMI在接種第二劑后1個(gè)月的反應(yīng)率為93.3%。HZ/su接受者的CMI反應(yīng)率在接種第二劑后的12個(gè)月下降到57.2%,在36個(gè)月時(shí)保持穩(wěn)定。在接種后的12個(gè)月、24個(gè)月和36個(gè)月,70歲及以上的HZ/su接受者的CMI反應(yīng)率略低于70歲以下的HZ/su接受者??偟膩碚f,在50歲及以上的HZ/su疫苗接種者中,接種第二劑后1個(gè)月,gE特異性CD42+ T細(xì)胞的頻率中位數(shù)比基線增加了24.6倍。接種后12個(gè)月,CD42+ T細(xì)胞的增加倍數(shù)有所下降,但之后保持穩(wěn)定。在長(zhǎng)期跟蹤隨訪研究(ZOE-LTFU)[13]中,直到第10年,gE特異性CD42+ T細(xì)胞反應(yīng)保持穩(wěn)定,是接種前水平的6倍以上(圖6)。

圖4  Shingrix誘導(dǎo)的gE特異性細(xì)胞介導(dǎo)免疫 [7]

圖5  CD4+ T細(xì)胞表達(dá)任意組合免疫marker的頻率:多功能性CD4+ T細(xì)胞頻率總體情況(A),按年齡組別的多功能性比例(B),以及整體激活marker組合(C)[7]

圖6  Shingrix誘導(dǎo)的gE特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)的長(zhǎng)期隨訪 [13]


PART 03

小結(jié)


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