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前言
近來CD276作為抗腫瘤生物藥物的新興靶點(diǎn)，吸引了廣泛的關(guān)注，這里我們總結(jié)梳理了CD276的背景知識，并開發(fā)了相應(yīng)的免疫組化檢測方法，給大家做一個簡要的介紹。
CD276簡介
CD276，又名B7-H3，是免疫調(diào)節(jié)蛋白B7家族的膜蛋白成員。B7-H3在免疫系統(tǒng)中具有雙重作用，是一種新的免疫檢查點(diǎn)，其在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也起到了重要的作用，如促進(jìn)腫瘤的遷移和侵襲，抗凋亡，促進(jìn)細(xì)胞活力，化療耐藥性，上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化等。
B7家族及其功能
CD276基因
CD276基因定位于15號染色體，包含7個外顯子和6個內(nèi)含子，編碼316個氨基酸[1]。 人類CD276蛋白有兩種剪接異構(gòu)體，分別為2IgB7H3和4IgB7H3。區(qū)別在于后者的胞外區(qū)為2個IgV、IgC的串聯(lián)重復(fù)結(jié)構(gòu)。2IgB7H3存在膜上和可溶性兩種形式而4IgB7-H3由于無法被裂解而只有存在于膜上[2]。熙寧生物CD276抗體識別位點(diǎn)位于胞外區(qū)V1段，可同時識別CD276基因翻譯的兩個蛋白。
人類CD276結(jié)構(gòu)示意圖[3]
CD276的表達(dá)與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系
多項(xiàng)研究證實(shí)，CD276在大多數(shù)正常組織中低表達(dá)，但在多種腫瘤組織中過表達(dá)。這使其成為一個非常有潛力的免疫治療靶點(diǎn)。
B7-H3在正常組織和部分腫瘤中的表達(dá)示例
B7-H3在各種人類實(shí)體瘤中的表達(dá)
CD276在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到了重要的作用
CD276作為T細(xì)胞抑制分子來促進(jìn)腫瘤的增殖和浸潤（盡管其早前被報導(dǎo)也可作為T細(xì)胞激活分子），其表達(dá)上調(diào)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸，同時減少IFN-γ , TNF-α及其他細(xì)胞因子的分泌。有研究報導(dǎo)，CD276可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞對葡萄糖的攝取以及無氧條件下的糖酵解，也參與腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。針對肝癌的研究表明，CD276促進(jìn)了癌細(xì)胞的EMT轉(zhuǎn)化，多項(xiàng)研究顯示CD276在腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)，參與腫瘤血管生成，且不會在正常血管中表達(dá)[4]。
CD276的表達(dá)與患者預(yù)后
癌癥患者中更高水平的CD276表達(dá)往往與預(yù)后不良相關(guān)[2,5]。Mao等在128例非小細(xì)胞肺癌中評估了CD276表達(dá)與臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。免疫組化染色結(jié)果顯示CD276在腫瘤細(xì)胞的胞膜和胞漿中表達(dá)，它的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、更高級別的TNM分期有關(guān)。共表達(dá)B7-H1和B7-H3（即CD276）的患者往往預(yù)后更差[6]。Yang等在一項(xiàng)56例接受一線EGFR激酶抑制劑治療的高級別肺腺癌研究中，通過免疫組化的方法檢測CD276的表達(dá)并對染色強(qiáng)度和陽性腫瘤細(xì)胞百分比進(jìn)行了統(tǒng)計分析，結(jié)果顯示CD276的高表達(dá)與更短的PFS（無進(jìn)展生存期）和OS（總生存期）顯著相關(guān)[7]。而Jung Hee Lee等針對透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌的研究也表明CD276的表達(dá)與更短的PFS相關(guān)，說明CD276可作為透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)[8]。
乳腺癌、卵巢癌、肺鱗癌、肝細(xì)胞癌及胃腺癌中，
CD276高表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)[5]
CD276相關(guān)藥物研究進(jìn)展
目前以CD276為靶點(diǎn)的在研藥物已超40個，涉及單抗、雙抗、ADC、CAR-T等各個領(lǐng)域（如下圖所示）。
CD276靶點(diǎn)相關(guān)部分臨床試驗(yàn)
MacroGenics開發(fā)的Enoblituzumab(MGA271)是一款人源化的抗CD276單抗，通過Fab端結(jié)合腫瘤細(xì)胞同時Fc端結(jié)合如NK細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞，觸發(fā)效應(yīng)細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞從而發(fā)揮抗腫瘤功能。I期臨床試驗(yàn)顯示該藥物具有很好的耐受性，在惡性黑色素瘤、前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌、腎透明細(xì)胞癌等多腫瘤類型中觀察到大于12周的疾病穩(wěn)定期和2%-69%的腫瘤縮小。在一項(xiàng)前列腺癌的II期新輔助治療試驗(yàn)中，接受enoblituzumab用藥的患者相比未用藥的顯示出CD8陽性T細(xì)胞顯著增加[9]。
第一三共的DS-7300是將CD276特異的單抗與DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑偶連的ADC藥物，在一項(xiàng)針對高級別實(shí)體瘤患者的I/II期研究中顯示出較好的藥物耐受性及抗腫瘤效果，另一項(xiàng)針對經(jīng)治的廣泛期小細(xì)胞肺癌的II期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中。
MacroGenics公司的另一款藥物Orlotamab是一種靶向CD276和CD3的雙抗，通過促使T細(xì)胞重新定位來殺死CD276表達(dá)的腫瘤細(xì)胞。而由于一些安全原因，Orlotamab被FDA終止了研究[10]。
而在眾多藥物中，靶向CD276的CAR-T細(xì)胞療法占據(jù)了半壁江山。如博生吉醫(yī)藥的TAA06注射液，已于去年獲得了FDA授予的孤兒藥資格認(rèn)定，其針對復(fù)發(fā)/難治神經(jīng)母細(xì)胞瘤的國內(nèi)I期臨床目前正在進(jìn)行中。
CD276免疫組化檢測方法簡介
熙寧生物 | 精翰生物免疫組化實(shí)驗(yàn)室已建立了成熟的CD276染色方法與判讀體系，適用肺癌、腸癌、食管癌等多個癌種，可快速用于CD276相關(guān)藥物開發(fā)過程中的入組檢測、探索性生物標(biāo)志物檢測等。
CD276染色等級示意圖
（來自熙寧生物|精翰生物IHC實(shí)驗(yàn)室）
肺癌
結(jié)直腸癌
食管癌
CD276在不同腫瘤上的染色
（熙寧生物 | 精翰生物免疫組化實(shí)驗(yàn)室）
熙寧生物免疫組化實(shí)驗(yàn)室
熙寧生物免疫組化實(shí)驗(yàn)室擁有BenchMark Ultra，Dako Autostainer Link 48等國際公認(rèn)的免疫組化染色平臺，遵從CAP和GCP體系要求，按照“合規(guī)，精準(zhǔn)，伴隨診斷”的理念，成功完成包括PD-L1、Claudin18.2、dMMR、TIM-3、TROP-2、AR等近200種靶標(biāo)的免疫組化方法開發(fā)（部分結(jié)果如下圖所示），多種方法已獲得國內(nèi)外權(quán)威機(jī)構(gòu)的認(rèn)可。
熙寧生物免疫組化實(shí)驗(yàn)室（精翰生物）室間質(zhì)評合格證書
GPC3
MAGE-A4
DLL3
CD276
NY-ESO-1
MSLN
PRAME
PD-1
CEACAM5
CD70
扁桃體
卵巢癌
扁桃體
結(jié)直腸癌
腎細(xì)胞癌
c-MET
AR
CCNE1
HIF-1a
p-SMAD2
肺癌
乳腺癌
卵巢癌
乳腺癌
腸癌
ATM
γ-H2A.X
STING
EZH2
pRb
卵巢癌
乳腺癌
卵巢癌
淋巴瘤
腸癌
CD39
CD73
Nectin-2
Nectin-4
TGF-beta
腸癌
扁桃體
睪丸
乳腺癌
肺癌
CK5
CK7
PVR
OX40
EpCAM
扁桃體
乳腺癌
胎盤
結(jié)腸癌
腎臟
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參考文獻(xiàn)
